生物化学实验教学大纲
课程编号：
课程英文名称： Biochemistry experiment
学时： 30
开课学期： 秋
适用专业（层次）： 临床医学、全科医学专业本科
实验目的：
生物化学是研究生命化学的科学，同时也是一门实验性科学。本课程的目的就是使广大
医学类本科学生通过实验课的学习，更好地验证所学的有关理论知识，并具有一定的科
研能力。
基本要求：
掌握本课程主要实验方法的概况，理解主要实验项目的操作及注意事项。了解生化实验
技术的发展方向。
实验学时： 30
实验内容：
一、分光光度法
目的要求：
1 、掌握分光光度法的基本原理。
2 、掌握比色定量分析的基本方法：标准曲线法和对比法。
3 、理解物质对光的定量吸收定律。
4 、了解分光光度计的分类及 721 （ 722 ）、 752 的基本结构与原理。
思 考 题：
1 、为什么物质对不同波长的光具有选择性吸收的特性？
2 、分光光度法用于物质的定性分析和定量分析有哪些区别？
血糖的测定
目的要求：
1 、理解可见光分光光度计的基本原理及使用。
2 、掌握血糖测定的原理及意义。
3 、理解正常成人的血糖含量与意义。
思 考 题：
1 、临床上常用的血糖测定方法有哪些？它们各自的基本原理。
2 、血糖测定的临床意义。
二、 血清总胆固醇的酶法测定
目的要求：
1 、掌握酶法分析（酶联反应）的基本原理。
2 、掌握定量分析中的对比法。
3 、掌握血清总胆固醇测定的临床意义。
思 考 题：
1 、血脂的概念、种类及运输形式。
2 、酶法分析（酶联反应）的基本原理与运用。
三、色谱法（层析法）
目的要求：
1 、掌握色谱法的基本概念。
2 、掌握分配色谱法的基本原理。
3 、理解色谱法的分类。
4 、了解液相 色谱（层析） 系统的组成、结构、基本操作及注意事项。
思 考 题：
1 、色谱系统如何构成？操作注意事项 。
2 、试述分配系数与溶质的移动速度及洗脱体积的关系。
四、血红蛋白与核黄素的凝胶柱色谱分离
目的要求：
1 、掌握凝胶过滤技术分离混合组分的原理。
2 、掌握洗脱曲线的绘制方法。
3 、理解凝胶过滤装置的安装和操作。
思 考 题：
1 、有哪些常用的生化分离技术？
2 、为什么本实验中 Hb 先流出层析床，而核黄素后流出层析床？
五、电泳法
目的要求：
1 、掌握电泳法的基本原理。
2 、掌握影响电泳速度的因素。
3 、理解电泳迁移率的概念和应用。
4 、了解电泳系统的组成、结构、基本操作及注意事项
思 考 题：
1 、试述电泳分离混合组分的原理。
2 、试述影响电泳速度的因素。
六、 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳
目的要求：
1 、掌握酶法分析（酶联反应）的基本原理。
2 、掌握定量分析中的对比法。
3 、掌握血清总胆固醇测定的临床意义。
思 考 题： 1 、血脂的概念、种类及运输形式。
2 、酶法分析（酶联反应）的基本原理与运用。
目的要求：
1 、掌握 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 的基本原理。
2 、掌握 血清蛋白 电泳区带及顺序。
思 考 题：
1 、试述 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的优、缺点。 。
2 、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 区带顺序及意义。
综 合 性 实 验
质粒 DNA 的制备 、 酶切 及 鉴定
1 、质粒 DNA 小量制备
2 、质粒 DNA 的限制性酶切
3 、质粒 DNA 的电泳鉴定
一、目的：
质粒为双链闭环的核酸（ DNA ）分子。
质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或表达的重要载体，在基因工程中具有极广泛的应
用价值。
本实验就是通过对质粒的操作，使同学初步掌握、理解、了解有关核酸的分离、纯化、
鉴定、分析等基本原理与技能，从今后可能的进一步研究打下基础。
二、掌握 :
碱变性裂解法制备质粒 DNA 的原理
限制性核酸内切酶的概念与用途
质粒 DNA （线型和闭环）的电泳和鉴别方法
三、理解 :
基因工程的概念和基本原理
质粒 DNA 的性质和用途
限制性核酸内切酶的识别位点与切割末端
四、了解：
基因工程的操作及实施
质粒的分类与酶切位点
教 学 时 间 分 配 表
序 号 | 项 目 | 学 时 | 备 注 |
1 | 分光光度法及其仪器使用 血糖的测定 | 4 | |
2 | 血清总胆固醇的酶法测定 | 4 | |
3 | 色谱法及其仪器使用 | 3 | |
4 | 血红素与核黄素的凝胶柱色谱分离 | 4 | |
5 | 电泳法及其仪器使用 | 3 | |
6 | 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 | 4 | |
综合性实验 | 质粒 DNA 的制备、酶切及鉴定 (1) 质粒 DNA 小量制备质粒 (2)DNA 的限制性酶切 (3) 质粒 DNA 的电泳鉴定 | 8 | |
总计 | 30 |
考核内容及办法：
1. 生物化学总分 100 分，理论成绩占 70% ，平时成绩占 10% ，实验成绩占 20% 。
2. 本学期有 9 次实验（含综合性实验），据每次实验报告的完成质量以百分制评分。
3. 平时考勤：每旷课或缺交实验报告一次，扣 10 分。
综合实验报告得分和考勤扣分，产生实验成绩 , 以百分制评分 , 折算相应成绩后计入
课程总评分数。
教材及参考书目：
教 材：
1. 《生物化学与分子生物学实验技术》厉朝龙主编 浙江大学出版社 2000.6 第 1 版
2. 《生物化学实验》江大医学与生命科学学院生化教研室 2001.9
参考书目：
《生物化学实验方法和技术》陈毓荃主编 科学出版社 2003.8 第 1 版
